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体视显微镜在鸡蛋胚胎观察中的应用

更新时间:2021-04-27   点击次数:2019
  在大量的化妆品广告中我们都能够听到“无刺激,低刺激,零刺激”等宣传语,那么除了自体测试以外实验室是怎么测试化妆品的刺激性呢?
 
  现在实验室中已经用鸡胚模型代替了大部分的动物实验,因为孵化的鸡蛋胚胎中期表面血管丰富,可以看作一个完整的生物体,且表面透明便于在实验中观察血管及其网络的形态结构、颜色和通透性的变化,结合绒毛尿囊膜蛋白质性质改变判断其受损程度,评估受试物的刺激性。此研究方法经济,且实验方法简单,易操作。
 
  实验方法:将在恒温恒湿孵育箱中孵育至第九天至第十天的受精鸡蛋取出到无菌操作台,从鸡蛋的气室端剪开蛋壳,小心剥去蛋膜即露出血管化的绒毛尿囊膜。肉眼观察尿囊膜的完整性及有无出血点等变化,如有出血点或尿囊膜破损则剔除,不能用于进一步的实验。将100μl的液体受试物加入置于CAM上限定面积的无刺激性橡胶环内,环直径1.5cm。固体受试物0.11g,用水湿润后,均匀的涂在直径1.5cm的无刺激性树脂薄片上,与CAM接触。20s后,用5ml的温热蒸馏水轻轻冲洗。
 
  在一段时间之后用体视显微镜观察绒毛尿囊膜上的血管及其网络的形态结构、颜色和通透性的变化(溶血、出血、凝血),结合绒毛尿囊膜蛋白质性质改变判断其受损程度,评估受试物的刺激性。用显微镜相机MS60进行原位摄影,记录及分析实验结果。
 
  鸡胚模型实验验条件简单,材料易于获取,方法易于掌握,应用范围广泛可检测洗涤类产品及其表面活性剂原料的刺激性、化妆品、护肤品、等的毒性实验,在日用化妆品公司、药厂等都会应用。体视显微镜加显微镜相机是该实验的必要配置。